Исследования биоэквивалентности

СТАНДАРТНАЯ ОПЕРАЦИОННАЯ ПРОЦЕДУРА

Исследование биоэквивалентности

Номер СОП: СОП-КИ-16

Версия: 1.0

Дата эффективности: 01.04.2025

Планируемая дата пересмотра СОП: 01.04.2027

           ФИО            Должность                                 Подпись   Дата

Утвердил Деева Н.А. Генеральный директор
Разработал Кулямин А.И. Специалист по клиническим исследованиям

История изменений документа

Версия Дата эффективности Изменения Необходимость тренинга

СОП-КИ-16, версия 1.0 01.04.2025 Первоначальный документ. Да

  1. НАЗНАЧЕНИЕ ПРОЦЕДУРЫ

Определить требования, предъявляемые к организации и проведению исследований биоэквивалентности лекарственных средств как вида клинических исследований, проводимых ООО «НатаДель» (Компанией), и роль ее сотрудников.

  1. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящая процедура применима к исследованиям биоэквивалентности на людях, проводимым Компанией. Процедура необходима для сотрудников, вовлеченных в разработку дизайна, документов, подготовку, организацию и мониторирование исследований биоэквивалентности.

  1. НОРМАТИВНО-ПРАВОВАЯ БАЗА

  2. ГОСТ Р 52379-2005 «Надлежащая клиническая практика»

  3. Федеральный закон РФ №61-ФЗ от 12.04.2010 г «Об обращении лекарственных средств»

  4. Правила надлежащей клинической практики Евразийского экономического союза (Решение Совета Евразийской экономической комиссии №79 от 03.11.2016 г.)

  5. Правила надлежащей производственной практики Евразийского экономического союза (Решение Совета Евразийской экономической комиссии №77 от 03.11.2016 г.)

  6. Решение Совета Евразийской экономической комиссии №85 от 03.11.2016 г. \"Об утверждении Правил проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза\"

  7. International Council for Harmonization of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (ICH) Guideline for Good Clinical Practice E6 (R2).

  8. ОПРЕДЕЛЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

GCP Good Clinical Practice

TMF Trial Master File БИ Брошюра исследователя ИП Исследуемый препарат ИРК Индивидуальная регистрационная карта КИ Клиническое исследование КИО Контрактная исследовательская организация КЦ Клинический центр ЛЭК Локальный этический комитет МЗ Министерство здравоохранения РКИ Разрешение на проведение клинического исследования СНЯ Серьезное нежелательное явление СОП Стандартная операционная процедура ФИС Форма информированного согласия

  1. ОБЯЗАННОСТИ

Руководитель

Принимает все ключевые решения (инициация проекта, назначение менеджера проекта, подписание договоров, утверждение подрядчиков, согласование команды проекта, утверждение расходов, и т.д.).

Менеджер проекта

Отвечает за ведение проекта КИ на всем протяжении, распределение обязанностей команды, контроль хода процесса, обмен информацией, документооборот, обеспечение вовлеченности всех сторон, формирование команды проекта, обеспечивает разработку, согласование, соблюдение и обновление необходимых планов проекта, обеспечивает выполнение всех применимых требований, эскалирует возникающие происшествия.

Менеджер проекта отвечает за формирование и контроль бюджета проекта и сроков проекта.

Монитор КИ

Осуществляет организацию исследования в клинических центрах и контроль за ходом исследования в них, отвечают за соблюдение плановых показателей клиническими центрами и за своевременную эскалацию выявленных проблем менеджеру проекта.

Менеджер по качеству

Оказывает консультативную поддержку проектной команде, осуществляет независимый контроль за качеством проведения исследования, проводя плановые и, при необходимости, внеплановые мероприятия обеспечения качества.

  1. ОПИСАНИЕ ПРОЦЕДУРЫ

Общие положения

Два лекарственных препарата, содержащих одинаковое количество действую­щего вещества, считаются биоэквивалентными, если они являются фармацев­тически эквивалентными или фармацевтически альтернативными и их биодо­ступность (по скорости и степени всасывания) после применения в одинаковой молярной дозе укладывается в заранее установленные допустимые пределы.

Как правило, исследования биоэквивалентности проводятся в целях регистрации, чтобы доказать эквивалентность воспроизведенного лекарствен­ного препарата референтному лекарственному препарату по качеству и, таким образом, экстраполировать результаты доклинических испытаний и клинических исследований, проведенных в отношении референтного лекарственного препарата, на воспроизведенный лекарственный препарат.

Предполагается, что фармакокинетически эквивалентные (биоэквивалентные) препараты обеспечивают одинаковую эффективность и безопасность фармакотерапии, т.е. что они терапевтически эквивалентны.

Проведение исследований биоэквивалентности требуется также:

  • при внесении изменений в регистрационное досье зарегистрированного лекарственного препарата, в частности, при изменении состава вспомогательных веществ, технологии производства, места производства, укрупнении или разукрупнении промышленной серии и т.п.,

  • на предрегистрационном этапе при существенном изменении состава, технологии производства разрабатываемого лекарственного препарата, при изменении лекарственной формы с немедленным высвобождением на лекарственную форму с модифицированным высвобождением, разработке комбинированных лекарственных препаратов и т.п.

При планировании исследований биоэквивалентности в регистрационных целях следует опираться на действующее законодательство и регламентирующие документы для уяснения, в частности

  • Возможности рассматривать подлежащий регистрации препарат, в соответствии с его составом и лекарственной формой, как воспроизведенный (генерик);

  • Необходимости проведения исследования биоэквивалентности для регистрации данного воспроизведенного лекарственного препарата;

  • Достаточности проведения исследования биоэквивалентности для регистрации данного воспроизведенного лекарственного препарата;

  • Объема и характера предстоящего исследования (исследование одной или нескольких дозировок, при однократном или многократном дозировании, при приеме препарата натощак или натощак и после приема пищи и т.п.);

  • Выбора лекарственной формы и дозировки для изучения;

  • Выбора референтного препарата (препарата сравнения);

  • Дизайна исследования;

  • Количества субъектов;

  • Приемлемых критериев биоэквивалентности, и др.

Выбор дизайна исследований биоэквивалентности должен основываться на имеющихся научных данных, отечественных, международных и зарубежных руководствах и методических рекомендациях. Объем и дизайн исследований биоэквивалентности зависит от физико-химических и фармакокинетических свойств действующего вещества, особенностей лекарственной формы и состава лекарственного препарата.

Если биоэквивалентность невозможно подтвердить с помощью исследований биодоступности, проводятся фармакодинамические или клинические исследования для проверки терапевтической эквивалентности.

Общие требования к исследованиям биоэквивалентности

Исследования биоэквивалентности (относительной биодоступности) - один из видов клинических исследований. При их проведении должны выполняться все требования, применимые к иссле­дованиям на людях, в частности правила Надлежащей клинической практики. Исследования биоэквивалентности чаще всего проводятся на взрослых здоровых добровольцах. Однако в зависимости от вида исследуемого препарата они могут проводиться на пациентах, включая уязвимые категории (дети, больные неизлечимыми заболеваниями, больные психическими заболеваниями и т.п.).

При проведении исследований биоэквивалентности должны в полном объеме соблюдаться этические принципы работы с субъектами исследования.

Добровольцы, участвующие в исследованиях биоэквивалентности, как правило, получают оплату за свое участие в качестве компенсации за время, потраченное на визиты и пребывание в клинике, неудобства и дискомфорт, связанные с проведением многочисленных обследований и забором биологических образцов. Оплата участникам исследования не может оправдывать проведение неэтичных исследований и исследований, представляющих чрезмерный риск для участников, или служить стимулом для участия субъектов в подобных испытаниях.

Оплата участникам исследования не уменьшает ответственности исследователя, медицинского учреждения, спонсора или их представителей за возможное причинение вреда жизни и здоровью пациента в результате некорректного проведения исследования.

Размер выплат участникам исследования может быть пропорционален их участию в испытании, но не должен зависеть исключительно от того, завершил ли субъект исследование полностью или нет.

Требования к дизайну и объему исследования

Стандартным дизайном при сравнении двух лекарственных препаратов считается рандомизированное, двухпериодное, перекрестное в двух последовательностях исследование с приемом однократной дозы.

Периоды должны быть разделены отмывочным периодом, достаточным для снижения концентрации действующего вещества ниже порога биоаналитического определения у всех субъектов в начале второго периода исследования; обычно для этого достаточно 5 периодов полувыведения (Т~1/2~) - чаще всего 7-14 дней.

Возможны, при соответствующем обосновании, общепризнанные альтернативные дизайны: параллельный - для веществ с длительным периодом полувыведения; повторный (репликативный, replicate design) - для веществ с высоко вариабельными фармакокинетическими параметрами.

Исследования биоэквивалентности, как правило, проводятся при приеме однократной дозы; при этом допустимо, представив соответствующие обоснования, использовать дозы, превышающие терапевтические.

Превышение максимальной терапевтической дозы допускается лишь в том случае, если она хорошо переносится здоровыми добровольцами и отсутствуют ограничения по степени абсорбции или растворимости лекарственного препарата, принятого в такой дозе.

Исследования с многократным приемом исследуемого препарата (исследования равновесных концентраций) менее чувствительны для определения различий в максимальной концентрации (С~mах~), поэтому их проведение допустимо при соответствующем обосновании лишь в исключительных случаях, например:

  • если вследствие непереносимости исследуемого препарата его прием здоровыми добровольцами недопустим, а у пациентов исследование однократной дозы провести невозможно (например, из-за необходимости постоянно принимать препарат сравнения);

  • в редких случаях, когда недостаточная чувствительность аналитического метода не позволяет точно определить концентрацию действующего вещества в биологической жидкости после приема однократной дозы, при этом равновесная концентрация, достигаемая при многократном приеме, достаточна для этого.

В последнем случае необходимо доказать, что чувствительность аналитического метода не может быть улучшена и что, даже при возможности использовать дозу, превышающую терапевтическую, точно измерить концентрацию после однократного приема невозможно.

В исследованиях равновесной концентрации отмывочный период после приема первого лекарственного препарата может перекрывать нарастание концентра­ции во втором периоде (при условии, что продолжительность такого нараста­ния достаточно длительная и составляет не менее 5 периодов полувыведения в конечной стадии элиминации (терминальных периодов полувыведения).

Исследования биоэквивалентности, как правило, проводят натощак, поскольку считается, что такое исследование наиболее чувствительно. Если согласно инструкции по применению препарата сравнения его следует применять исключительно после еды, то исследование биоэквивалентности проводят после приема пищи. Однако для некоторых лекарственных форм (например, микроэмульсии, твердые дисперсии) исследование биоэквивалентности проводят как натощак, так и после приема пищи; указанное правило не применяется, если лекарственный препарат необходимо принимать либо строго натощак, либо строго после еды.

Для любых лекарственных препаратов исследование биоэквивалентности следует проводить в отношении исходного соединения, поскольку для обнаружения различий в скорости абсорбции С~mах~ исходного соединения обычно является более чувствительным показателем, чем С~mах~ его метаболита. Использовать сведения о метаболите вместо данных об активном исходном соединении допустимо лишь в исключительных случаях, предоставив доказательства, что чувствительность аналитического метода не может быть улучшена и что после однократного приема лекарственного препарата точно измерить концентрацию исходного соединения невозможно, даже если допустимо использовать дозу, превышающую максимальную разовую дозу. При этом необходимо также представить сведения, подтверждающие, что экспозиция метаболита (выраженная в виде AUC) отражает экспозицию исходного соединения и что в терапевтических дозах образование метаболита не является насыщаемым процессом.

При исследовании неактивных пролекарств (inactive pro-drugs) исследование биоэквивалентности также следует проводить в отношении исходного соединения без определении концентрации активного метаболита. Подтверждать биоэквивалентность по основному активному метаболиту без измерения концентрации исходного соединения допустимо лишь в случаях, когда концентрация пролекарства в биологических жидкостях очень низкая, и они быстро элиминируются из кровотока, что затрудняет подтверждение биоэквивалентности по исходному соединению.

При сравнении лекарственных препаратов, представляющих собой смеси энантиомеров, можно использовать нестереоспецифичные биоаналитические методы, без определения уровня каждого энантиомера. Однако концентрацию каждого энантиомера требуется измерять при выполнении всех нижеперечисленных условий:

  • энантиомеры обладают различными фармакокинетическими свойствами;

  • фармакодинамические свойства энантиомеров существенно различаются;

  • отношение экспозиции энантиомеров (выраженной в виде AUC) меняется при изменении абсорбции.

Концентрацию каждого энантиомера необходимо измерять также при отсутствии сведений об этих условиях. Если фармакологической активностью обладает только один из энантиомеров, а фармакологическая активность второго энантиомера низкая или полностью отсутствует, то достаточно подтверждать биоэквивалентность только для активного энантиомера.

При исследовании эндогенных веществ фармакокинетические параметры необходимо измерять с поправкой на фоновое содержание, чтобы полученные значения относились к дополнительным концентрациям, полученным вследствие приема лекарственного препарата. При условии приемлемой переносимости в исследованиях биоэквивалентности эндогенных веществ допустимо применение доз, превышающих максимальные разовые дозы.

Если разница в экспозиции после приема различных доз эндогенного вещества ранее не была показана, ее необходимо определить либо в пилотном исследовании, либо в рамках одного из периодов основного исследования биоэквивалентности с использованием различных доз референтного лекарственного препарата, чтобы подтвердить, что доза, выбранная для изучения биоэквивалентности позволит определить потенциальные различия между лекарственными препаратами.

В протоколе исследования необходимо заранее определить метод, используемый для поправки на фоновое содержание эндогенного вещества; в качестве поправки предпочтительно использовать стандартное вычитание: вычитается либо средняя концентрация эндогенного вещества, определенная до приема препарата, либо средняя AUC.

Изредка, когда концентрация эндогенного вещества после приема лекарственного препарата существенно превышает фоновую, поправка на фоновое содержание эндогенного вещества не требуется. Поскольку в исследованиях биоэквивалентности эндогенных веществ не представляется возможным напрямую оценить наличие эффекта переноса, необходимо предусмотреть достаточную длительность отмывочного периода между назначениями исследуемых препаратов.

При планировании регистрационного исследования биоэквивалентности, когда регистрации подлежат несколько дозировок одной лекарственной формы, необходимо в соответствии с действующим законодательством и рекомендациями определить, какие дозировки подлежат исследованию биоэквивалентности на людях (in vivo). В зависимости от пропорциональности состава различных дозировок и других регламентированных регуляторными органами показателей исследование биоэквивалентности in vivo проводится в отношении одной или двух дозировок.

Выбор дозировки (дозировок) для исследования in vivo зависит от линейности фармакокинетики действующего вещества, то есть от пропорциональности увеличения AUC в зависимости от принимаемой дозы. Как правило, исследование проводится для наибольшей дозировки; в ряде случаев допустимо проводить исследование для меньших дозировок, в том числе, когда это может быть обосновано с позиций безопасности или переносимости.

При исследовании лекарственных препаратов с нелинейной фармакокинетикой, у которых AUC в терапевтическом диапазоне увеличивается меньше, чем соответствующее увеличение дозы, в большинстве случаев исследование биоэквивалентности требуется проводить для наибольшей и наименьшей дозировок, то есть в этом случае проводится два исследования биоэквивалентности. Если исследование биоэквивалентности требуется провести более чем для двух дозировок, например, вследствие различий в пропорциональности состава, используют подход, позволяющий ограничиться проведением исследований крайних вариантов (брекетинг - bracketing).

Для представляемых на регистрацию дозировок, для которых исследование биоэквивалентности на людях не планируется, необходимо проведение теста сравнительной кинетики растворения (ТСКР) для доказательства, что исследование этих дозировок на людях не требуется (биовейвер дополнительных дозировок).

Требования к выбору субъектов исследования

Количество субъектов, включенных в исследование биоэквивалентности, должно основываться на должном расчете размера выборки. Количество включенных в анализ субъектов исследования биоэквивалентности должно быть не менее 12 (двенадцати - Правила проведения исследований биоэквивалентности ЕАЭС). При этом Методические указания по оценке биоэквивалентности лекарственных средств МЗиСР РФ (2008 года) рекомендуют минимальное число включенных испытуемых 18 человек.

С целью снижения вариабельности результатов, не обусловленной различиями между лекарственными препаратами, исследования рекомендуется проводить на здоровых добровольцах, за исключением случаев, когда лекарственные препараты несут очевидную угрозу их здоровью и делают такие исследования неэтичными. В большинстве случаев исследование на здоровых добровольцах считается приемлемым и позволяет экстраполировать результаты исследования на лиц, для которых одобрено применение референтного лекарственного препарата (в частности, на лиц пожилого возраста, детей, пациентов с почечной или печеночной недостаточностью и т.д.).

Возраст здоровых добровольцев должен быть не менее 18 лет с индексом массы тела, по возможности, 18,5 - 30 кг/м^2^. Пол добровольцев не имеет значения, однако необходимо учитывать риск для женщин детородного возраста.

Методические указания Министерства здравоохранения и социального развития РФ (2008 года) рекомендуют устанавливать верхнюю границу возраста испытуемых в 45 лет. Формально не отмененный Приказ Министерства здравоохранения РСФСР № 235 от 25 августа 1992 года «Об организации отделений клинических испытаний лекарственных препаратов на здоровых добровольцах» устанавливает нижнюю границу возраста добровольцев в 21 год и исключает проведение исследований на женщинах детородного возраста. Указанные выше ограничения могут не приниматься во внимание в связи с вступлением в силу Правил проведения исследований биоэквивалентности ЕАЭС.

Если исследуемое действующее вещество вызывает нежелательные реакции и (или) фармакологические эффекты, представляющие неприемлемые риски для здоровых добровольцев, при условии принятия необходимых мер предосторожности и установления соответствующего наблюдения, допускается включение в исследование пациентов.

Участники испытания, по возможности, должны быть некурящими; алкоголизм и наркомания (в том числе в анамнезе) являются критериями для их невключения в исследование.

Если выбран параллельный дизайн исследования, необходимо предусмотреть меры для обеспечения сопоставимости сравниваемых групп по всем значимым переменным, которые могут повлиять на фармакокинетику действующего вещества (включая возраст, массу тела, пол, этническую принадлежность, курение, принадлежность к «быстрым» или «медленным» метаболизаторам).

Соответствие субъектов условиям отбора необходимо подтвердить лабораторными исследованиями, анамнезом и медицинским осмотром. В зависимости от фармакотерапевтической группы и профиля безопасности лекарственного препарата до, во время, и по окончании исследования необходимо провести специальные исследования и принять соответствующие меры предосторожности.

Протокол исследования биоэквивалентности должен содержать четкое описание критериев включения и невключения субъектов в исследование. Дополнительные по сравнению с действующими правилами и рекомендациями ограничения и требования, предъявляемые к выбору субъектов исследования, должны быть обоснованы.

Требования к исследуемому препарату и препарату сравнения

Лекарственные препараты, используемые в исследованиях биоэквивалентности в качестве изучаемого и референтного, должны быть произведены в соответствии с правилами Надлежащей производственной практики.

Исследуемый лекарственный препарат, который будет предоставлен для изучения биоэквивалентности, по составу, технологии производства и использованному производственному оборудованию не должен отличаться от лекарственного препарата, который поступит на фармацевтический рынок, что должно быть подтверждено заявителем. Серия исследуемого препарата для доказательства его биоэквивалентности должна выбираться с учетом действующего законодательства и рекомендаций.

Выбор референтного препарата (препарата сравнения), как в плане производителя, так и лекарственной формы, определяется действующим законодательством и рекомендациями регуляторных органов.

Как правило, исследуемый лекарственный препарат сравнивают с такой же лекарственной формой и дозировкой референтного лекарственного препарата. Однако если препарат сравнения представлен на рынке в нескольких лекарственных формах, рекомендуется использовать для сравнения ту из них, в виде которой он был впервые зарегистрирован, и которая использовалась в клинических исследованиях для подтверждения его эффективности и безопасности.

Заявитель исследования должен обосновать выбор серии референтного препарата в соответствии с действующим законодательством с учетом результатов количественного определения действующего вещества и данных о его растворении, для чего проводятся сравнительные тесты растворения исследуемого и референтного препаратов (тесты сравнительной кинетики растворения, ТСКР). При отсутствии должного обоснования содержание действующего вещества в передаваемой для испытания серии исследуемого препарата не должно отличаться более чем на 5% от серии референтного лекарственного препарата.

Исследуемый и референтный препараты до проведения исследования должны быть упакованы индивидуально для каждого субъекта и периода исследования. Допускается осуществлять такую упаковку в самом исследовательском центре. Упаковку (включая маркировку) следует осуществлять в соответствии с применимыми правилами Надлежащей производственной практики.

Необходимо предусмотреть возможность точного установления подлинности лекарственных препаратов, применяемых каждым субъектом в каждом периоде исследования. В связи с этим необходимо подробно документировать упаковку, маркировку и введение лекарственных препаратов субъектам. Такая документация должна содержать описание всех мер, принятых для недопущения и обнаружения ошибок дозирования. Рекомендуется использовать этикетки с отрывным корешком.

Стандартизация условий исследования

Чтобы свести к минимуму вариабельность всех вовлеченных факторов, за исключением особенностей сравниваемых лекарственных препаратов, условия проведения исследования должны быть стандартизированы. Стандартизации подлежат рацион, прием жидкости и физические нагрузки субъектов исследования.

В отсутствие обоснований другого подхода субъекты не должны принимать пищу как минимум за 8 час до приема исследуемого и референтного препарата. После приема препаратов прием пищи разрешается не ранее чем через 4 часа. Рацион и время приема пищи после приема препаратов необходимо стандарти­зировать в течение достаточного периода времени (например, 12 часов). Время приемов пищи каждым добровольцем должно документироваться.

Поскольку прием жидкости может влиять на прохождение через желудок принимаемых внутрь препаратов, исследуемый и референтный лекарственные препараты необходимо запивать стандартным объемом жидкости (150-250 мл). В течение 1 часа до и 2 часов после этого прием жидкости должен быть запрещен, в остальное время устанавливается свободный питьевой режим.

Если исследуемый и референтный препараты должны назначаться после приема пищи, препараты и пищу принимают в соответствии с инструкцией по применению препарата сравнения. Если такие рекомендации отсутствуют, прием пищи начинают за 30 минут до приема препарата, продолжительность приема пищи составляет 30 минут. Время, длительность приемов пищи и количество принятой пищи и выпитой жидкости должны документироваться.

В исследованиях с приемом препарата после еды состав пищи должен соответствовать рекомендациям инструкции по применению референтного лекарственного препарата. Если в инструкции отсутствуют какие-либо рекомендации по этому поводу, то пища должна быть высококалорийной (800 - 1000 ккал), с высоким содержанием жиров (около 50% от общей калорийности), на белки должно приходиться 150 ккал, на углеводы - 250 ккал и на жиры - 500-600 ккал. Необходимо описать состав пищи относительно содержания в ней белков, жиров и углеводов в граммах, абсолютном и относительном содержании калорий.

Поскольку биодоступность может зависеть от длительности прохождения через желудочно-кишечный тракт и интенсивности регионарного кровотока, требуется стандартизация положения тела и физической активности субъекта.

В течение определенного периода до и во время исследования субъекты должны воздерживаться от приема пищи и напитков, которые могут повлиять на функцию сердечно-сосудистой, пищеварительной системы, печени и почек (например, алкогольные напитки и некоторые соки, такие как грейпфрутовый).

Субъектам не следует принимать какие-либо сопутствующие лекарственные препараты (включая препараты растительного происхождения) в течение определенного периода до и во время исследования. При этом применение контрацептивов допускается.

Если прием сопутствующих лекарственных препаратов все же необходим, и они назначены субъекту (например, для купирования нежелательных явлений), исследователь должен отразить сведения об этом в первичных документах (название препарата, доза и время применения). Необходимо оценить влияние этого факта на результаты исследования.

В редких случаях из соображений безопасности или переносимости всем субъектам назначают сопутствующие лекарственные препараты (например, антагонисты опиоидных рецепторов, противорвотные средства). В этом случае необходимо учитывать возможность лекарственного взаимодействия или влияния этих препаратов на биоаналитическую методику, что может сказаться на результатах исследования.

Лекарственные препараты, которые в соответствии с инструкцией по применению референтного лекарственного препарата должны применяться только в комбинации с другим лекарственным препаратом (например, некоторые ингибиторы протеазы ВИЧ применяют только в комбинации с ритонавиром), разрешается принимать как отдельно, так и в комбинации с рекомендуемым лекарственным препаратом.

При изучении биоэквивалентности эндогенных соединений необходимо контролировать факторы, влияющие на их фоновое содержание (например, строгий контроль принимаемой пищи).

Протокол исследования биоэквивалентности должен описывать условия проведения исследования. Дополнительные по сравнению с действующими правилами и рекомендациями ограничения и требования, предъявляемые к условиям проведения исследования, должны быть обоснованы.

Требования к биоаналитическим методикам

Скорость и степень всасывания оцениваются, как правило, на основании измерения уровня действующего вещества в сыворотке или плазме крови, соответственно биологической жидкостью, отбираемой для измерения концентрации действующих веществ, должна быть кровь.

Если отсутствует возможность измерить содержание действующего вещества в плазме, а действующее вещество экскретируется в неизменном виде с мочой и существует пропорциональная взаимосвязь между концентрациями действующего вещества в крови и моче, в качестве биологического материала может использоваться моча.

Необходимо обосновать использование мочи в качестве биологического материала, в частности представить сведения, подтверждающие, что экскреция с мочой отражает экспозицию в плазме. Тем не менее, следует по возможности избегать использования только данных о выделении действующего вещества с мочой, так как это не позволяет рассчитать t~max~ и максимальную концентрацию вещества в системном кровотоке. Если удается получить достоверные сведения о С~mах~ в плазме, то для оценки биоэквивалентности эти данные необходимо представить наряду с величиной экспозиции, полученной при использовании мочи.

Биоаналитические методики, используемые для определения уровня лекарственного препарата в биологических жидкостях, должны быть валидированы в соответствии с действующими нормативными требованиями. Целью валидации является подтверждение надежности биоаналитической методики для определения концентрации анализируемого вещества в биологических образцах.

Любая биоаналитическая методика, независимо от того новая она или известная, подлежит полной валидации. При незначительных изменениях ранее валидированной аналитической методики (в зависимости от характера таких изменений) допускается проведение частичной валидации.

К изменениям, в отношении которых допускается проведение частичной валидации, относятся трансфер биоаналитической методики в другую лабораторию, замена оборудования, изменение диапазона применения, ограниченный объем биологических образцов, изменение разновидности биологического образца или вида животного, замена антикоагулянта, изменение процедуры пробоподготовки, условий хранения и др. В аналитическом отчете необходимо отразить все произошедшие изменения и обосновать объем повторной или частичной валидации.

До начала анализа образцов в протоколе исследования, протоколе валидации, плане анализа или СОП лаборатории должны быть установлены возможные причины повторного анализа испытуемых образцов и критерии выбора значений, подлежащих включению в аналитический отчет. Повторный анализ испытуемых образцов по фармакокинетическим причинам, как правило, неприемлем, поскольку он может повлиять на результаты исследования и исказить их. В отчете об исследовании необходимо обосновать количество образцов (и их долю от общего количества), подвергшихся повторному анализу.

Лица, осуществляющие анализ образцов, не должны знать о принимаемых субъектами исследуемых препаратах.

Аналитическая лаборатория должна предоставить организатору исследования (спонсору или КИО) отчет о валидации методики, подготовленный в соответствии с действующими нормативными требованиями, до начала исследования.

После окончания аналитической части аналитическая лаборатория должна предоставить организатору исследования (спонсору или КИО) аналитический отчет, подготовленный в соответствии с действующими нормативными требованиями.

Требования к точкам отбора и биологическим образцам

Для точного описания профиля «концентрация - время» необходимо отобрать достаточное количество образцов плазмы (сыворотки). Для точной оценки максимальной экспозиции необходимо предусмотреть частый отбор образцов вблизи предполагаемого t~max~ в частности, график отбора образцов должен быть составлен так, чтобы С~max~ не являлась первой точкой на кривой «концентрация - время».

Количество отобранных образцов должно быть также достаточным, чтобы обеспечить надежную оценку длительности экспозиции. Это достигается, когда AUC~(0-t)~ перекрывает не менее 80% от AUC(~0-∞~).

Для надежной оценки константы скорости терминальной элиминации (которая необходима для достоверной оценки AUC(~0-∞~) в течение терминальной фазы следует отобрать не менее 3-4 образцов.

Так как фаза абсорбции лекарственного препарата для приема внутрь с немедленным высвобождением не превышает 72 часов, для сравнения длительности экспозиции в качестве альтернативы AUC(~0-t~) может использоваться AUC, усеченная до 72 часов (AUC(~0-72ч~)). Поэтому для любых лекарственных препаратов с немедленным высвобождением независимо от Т~1/2~ активного вещества отбор образцов в течение более 72 часов не требуется.

В исследованиях с многократным приемом исследуемого препарата для точного определения AUC(~0-τ~) «преддозовый» образец следует забирать непосредственно (в течение 5 минут) перед приемом лекарственного препарата, а последний образец - в течение 10 минут после заданного интервала дозирования.

Если в качестве биологического материала, в котором определяется содержание действующего вещества, выбрана моча, то ее необходимо собирать в течение не менее трех Т~1/2~ в терминальной фазе. Однако так же, как и для образцов крови, сбор мочи в течение более 72 часов не требуется. Для определения скорости экскреции интервалы между отбором образцов в фазе абсорбции должны быть, по возможности, как можно короче.

Для эндогенных соединений схема отбора образцов должна позволить описать их фоновое содержание для каждого субъекта в каждом периоде. Как правило, такое определение возможно путем отбора 2-3 образцов до приема лекарственного препарата.

В некоторых случаях, чтобы учесть циркадные колебания фонового содержания эндогенного соединения, требуется регулярно определять его концентрацию в течение 1-2 дней до приема лекарственного препарата.

Из полученных биологических образцов должны готовиться пробы (аликвоты) для замораживания, последующего хранения и отправки в аналитическую лабораторию. Образцы биологических жидкостей необходимо обрабатывать и хранить в условиях, при которых ранее не обнаруживалось разложение анализируемых веществ (в большинстве случаев приемлемым является хранение при температуре не выше -20°С).

В обязательном порядке для каждой временной точки одновременно готовятся основная и запасная проба (аликвоты). Чтобы избежать риска одновременного повреждения и (или) утраты, исследовательский центр должен хранить основные и запасные аликвоты в разных морозильных камерах; не допускается одновременная отправка из центра основных и запасных образцов. Хранящиеся в исследовательском центре запасные образцы не могут быть уничтожены до получения подтверждения о том, что аналитическая часть исследования завершена.

Схема отбора образцов, правила пробоподготовки, условия хранения и пересылки биологических образцов должны быть детально регламентированы в протоколе или лабораторном руководстве для исследователей. Правила пробоподготовки, условия хранения и пересылки биологических образцов должны быть согласованы с аналитической лабораторией.

Исследовательская команда должна документировать, а монитор клинического исследования - контролировать условия хранения биообразцов в исследовательском центре.

Пересылка биообразцов должна осуществляться с документированным контролем температурного режима; подтверждение температурного режима курьерской отправки должно быть предоставлено монитору исследования.

Аналитическая лаборатория должна проконтролировать качество биологических образцов при их получении и направить в исследовательский центр подтверждение о получении.

Требования к анализу результатов исследования

В статистический анализ необходимо, по возможности, включить всех субъектов, принявших лекарственный препарат.

В анализ не должны включаться:

  • субъекты, участвовавшие в перекрестном исследовании, у которых отсутствуют данные как по исследуемому лекарственному препарату, так и по референтному лекарственному препарату, и

  • субъекты, участвовавшие в параллельном исследовании, у которых отсутствуют данные единственного периода.

Обработку данных всех субъектов, принимавших лекарственный препарат, необходимо осуществлять одинаковыми методами. Не допускается предусматривать в протоколе исследования включение в анализ данных о «дублерах» добровольцев только с целью замены данных исключенных субъектов; необходимо предусмотреть включение в анализ всех субъектов, принявших препарат, включая «дублеров», даже если в ходе исследования не было выбываний из исследования.

Допустимые критерии исключения субъектов из статистического анализа должны быть заранее описаны в протоколе, а решение об исключении должно быть принято до начала лабораторного анализа образцов. В принципе, любая причина может являться критерием исключения, если она описана в протоколе, а решение об исключении принято до начала анализа образцов. Однако поскольку исключение субъектов из анализа приводит к снижению статистической мощности исследования, этого следует, по возможности, избегать; минимально в анализ должно быть включено 12 субъектов.

Примерами обоснованного исключения данных субъекта в том или ином периоде из анализа являются рвота или диарея, которые могут исказить результаты измерения концентрации анализируемого вещества. В исключительных ситуациях критерием исключения также может служить одновременное применение других лекарственных препаратов.

Исследователи должны описать события, явившиеся причиной исключения данных из анализа, в первичной документации и индивидуальной регистрационной карте (ИРК) в ходе исследования. Информация об исключении части данных из анализа должна быть четко и полно изложена в отчете о проведенном исследовании.

Исключение данных из анализа после проведенного анализа биообразцов только на основании результатов статистического анализа или по фармакокинетическим причинам не допускается, поскольку невозможно отделить влияние лекарственных препаратов от других факторов, влияющих на фармакокинетику.

Два возможных исключения из этого правила, однако, описаны ниже.

  • Субъекты, в плазме которых концентрация [референтного]{.underline} лекарственного препарата не определяется или определяется лишь в незначительных количествах. Концентрации анализируемого вещества у субъекта признаются очень низкими, если его AUC не превышает 5% от средней геометрической AUC референтного препарата (рассчитанной без учета данных этого субъекта). Исключение данных по этой причине допустимо лишь в единичных случаях и в целом ставит под сомнение достоверность (валидность) проведенного исследования.

  • Субъекты с ненулевой исходной концентрацией анализируемого вещества, превышающей 5% от С~mах~.

Такие данные необходимо исключить из исследования биоэквивалентности из-за эффекта переноса.

В отношении лекарственных препаратов с немедленным высвобождением указанные выше ситуации могут возникать в случае несоблюдения субъекта­ми режима исследования или при недостаточном отмывочном периоде. Предупредить их в первом случае можно с помощью осмотра ротовой полости субъекта, чтобы удостовериться, что лекарственный препарат был проглочен, во втором - предусмотрев достаточный отмывочный период.

Биологические образцы субъектов, исключенных из статистического анализа, должны быть проанализированы, и результаты представлены в отчете об исследовании.

В исследованиях биоэквивалентности с однократным приемом препарата к исследуемым фармакокинетическим параметрам относятся AUC(~0-t~) или, если применимо, [AUC(~0-72~) и]{.smallcaps} С~max~. Отношение этих параметров исследуемого препарата к референтному препа­рату должно лежать в интервале от 80,00% до 125,00% при 90% доверитель­ном интервале, при округлении результатов до двух знаков после запятой.

В исследованиях биоэквивалентности с определением равновесной концентрации при многократном приеме препарата к исследуемым фармакокинетическим параметрам относятся AUC(~0-τ~) и C~max~,~ss~, которые также должны быть в пределах указанных интервалов.

Если в качестве биологического материала используется моча, показатель Ae(~0-t~) должен лежать в интервале, описанном для AUC(~0-t~), a R~max~ - в интервале для С~mах~.

Статистическая оценка t~max~ не требуется. Однако если указывается, что быстрое высвобождение имеет клиническую значимость с точки зрения начала действия или нежелательных реакций, значимых различий в t~max~ и его вариабельности между исследуемым и референтным препаратами быть не должно.

Допустимые пределы биоэквивалентности лекарственных препаратов с узким терапевтическим диапазоном следует сузить до 90,00 - 111,11 %. Для лекарственных препаратов с высокой вариабельностью С~mах~ в случае наличия соответствующего обоснования эти границы могут быть расширены.

Требования к оценке и представлению результатов исследования

Главное значение для оценки биоэквивалентности имеет минимизация риска ложноположительного признания биоэквивалентности. Статистический анализ должен подтвердить маловероятность клинически значимого различия между биодоступностыо исследуемого и референтного препаратов. Процедуры статистической обработки должны быть оговорены в протоколе перед началом сбора данных.

Отчет о проведенном исследовании, отчет о валидации биоаналитического метода и аналитический отчет должны быть подготовлены в соответствии с действующими нормативными требованиями.

Отчет о проведенном исследовании должен быть детализирован настолько, чтобы фармакокинетический и статистический анализы можно было воспроизвести, то есть он должен включать точное время отбора образцов после приема лекарственного препарата, концентрации анализируемых веществ, значения фармакокинетических параметров каждого субъекта в каждом периоде исследования и схему рандомизации.

В отчете о проведенном исследовании необходимо подробно описать все случаи выбывания и исключения субъектов из исследования и (или) анализа. По возможности, для каждого выбывшего или исключенного из анализа субъекта в отдельном документе необходимо представить данные о концентрации и фармакокинетических параметрах, не включая их в общий статистический анализ.

Если в отношении определенной дозировки лекарственного препарата проведено несколько исследований, часть из которых подтверждает его биоэквивалентность, а часть нет, всю совокупность данных необходимо рассматривать как единое целое. Наличие исследований, подтверждающих биоэквивалентность, не является поводом не рассматривать исследования, в которых она не подтверждена; заявитель должен тщательно проанализировать все результаты и обосновать наличие биоэквивалентности. В качестве альтернативы в дополнение к отдельным исследованиям, по возможности, допускается проведение обобщенного анализа всех исследований. Недопустимо обобщать исследования, не подтверждающие наличие биоэквивалентности, если исследования, подтверждающие биоэквивалентность, отсутствуют.

Планирование и подготовка исследования

Подготовка исследования биоэквивалентности включает в себя, как минимум:

  • Подготовку протокола исследования;

  • Подготовку схемы рандомизации;

  • Подготовку стандартных документов для клинического исследования: Брошюры исследователя, Информационного листка пациента (добровольца), Карточки участника исследования, Индивидуальной регистрационной карты (ИРК), Плана мониторирования и, при необходимости, других;

  • Подготовку руководства по забору и обработке биологического материала (лабораторного руководства) для исследователей;

  • Выбор исследовательского центра;

  • Выбор аналитической лаборатории;

  • Валидацию аналитического метода и составление (получение) отчета о валидации;

  • Подготовку и доставку в исследовательский центр исследуемого препарата и препарата сравнения, включая индивидуальную упаковку и маркировку для каждого субъекта и периода исследования.

В зависимости от договорных обязательств Компания может осуществлять все или часть указанных функций, своими силами или силами поставщиков.

Менеджер проекта должен убедиться, что задачи Компании и распределение обязанностей между участвующими сторонами (Компанией, спонсором, поставщиками услуг и исследовательским центром) документированы (например, в Плане мониторирования) и утверждены спонсором исследования.

Менеджер проекта должен убедиться, что выбранный исследовательский центр и аналитическая лаборатория одобрены спонсором исследования.

В случае если исследовательский центр и аналитическая лаборатория выбраны Компанией, они должны быть отобраны в соответствии с утвержденной процедурой Компании об отборе (квалификации) поставщиков. В случае если исследовательский центр и (или) аналитическая лаборатория выбраны спонсором исследования, Менеджер проекта должен запросить у спонсора подтверждение, что они отобраны спонсором на основании процедуры отбора (квалификации) поставщиков и процедура повторной квалификации со стороны Компании не требуется. В отсутствии такого подтверждения необходимо проведение отбора (квалификации) поставщиков в соответствии с процедурой Компании.

Протокол исследования должен содержать детальное описание плана предстоящего исследования и анализа его результатов, обоснование выбранного объема и дизайна исследования, вида субъектов (взрослые здоровые добровольцы, пациенты, уязвимые категории и т.п.) и размера выборки.

Менеджер проекта должен согласовать со спонсором и документировать (например, в Плане мониторирования) сроки поставки исследуемого и референтного препаратов в исследовательский центр и сторону, ответственную за индивидуальную (для каждого субъекта и периода исследования) упаковку и маркировку препаратов.

Если индивидуальную упаковку и маркировку препаратов будет проводить исследовательский центр, Менеджер проекта должен убедиться, что центр располагает надлежащим образом документированной и утвержденной процедурой (СОП, рабочая инструкция, либо протокол исследования).

Схема рандомизации готовится и предоставляется стороне, осуществляющей индивидуальную упаковку и маркировку препаратов. Учитывая открытый характер исследования, ответственным за подготовку и передачу схемы рандомизации может быть любой член проектной команды, уполномоченный Менеджером проекта.

Если индивидуальная упаковка и маркировка будет проводиться в исследовательском центре, схема рандомизации предоставляется исследовательскому центру отдельно от протокола исследования. Учитывая открытый характер исследования, схема рандомизации может быть направлена Главному исследователю или координатору исследования для последующего использования сотрудниками, ответственными за упаковку и маркировку; однако следует избегать предоставления схемы рандомизации всем членам исследовательской команды.

Менеджер проекта обеспечивает разработку Плана мониторирования и утверждение его спонсором исследования.

Менеджер проекта согласовывает с аналитической лабораторией сроки выполнения работ и предоставления Компании отчета о валидации биоаналитической методики до начала исследования и аналитического отчета после его завершения.

Менеджер проекта обеспечивает подготовку лабораторного руководства для исследователей.

Лабораторное руководство должно описывать, как минимум:

  • Правила отбора биологического материала;

  • Порядок и сроки обработки биологического материала и подготовки проб для анализа (аликвот);

  • Правила маркировки биологического материала и аликвот;

  • Правила хранения аликвот;

  • Правила пересылки аликвот;

  • Адрес аналитической лаборатории и контактные данные курьерской компании;

  • Требования к формам учета и сопроводительным формам.

Менеджер проекта обеспечивает согласование Лабораторного руководства с аналитической лабораторией, которая будет анализировать биообразцы.

Согласованное с лабораторией Лабораторное руководство должно быть одобрено спонсором исследования.

Мониторирование исследования

Менеджер проекта обеспечивает мониторирование исследования в соответствии с утвержденным Планом мониторирования.

Мониторы КИ контролируют проведение исследования в исследовательском центре, обращая особенное внимание на:

  • Правильное назначение исследуемого и референтного препаратов каждому субъекту в каждом периоде исследования;

  • Сроки обработки биологического материала и подготовки аликвот;

  • Соблюдение правил хранения и пересылки аликвот, в том числе раздельное хранение и пересылку основных и запасных аликвот.

Оформление результатов исследования

Отчет о проведении исследования биоэквивалентности готовится в соответствии с действующими нормативными требованиями и рекомендациями. Отчет включает в себя отчет о валидации биоаналитической методики, биоаналитический и статистический отчеты.

К биоаналитическому отчету необходимо приложить хроматограммы из полных аналитических циклов не менее 20 % субъектов. В биоаналитическом отчете необходимо описать все отклонения от плана анализа, аналитической методики или СОП аналитической лаборатории.

  1. ПЕРЕЧЕНЬ ПРИЛОЖЕНИЙ

Приложение 1. Лабораторное руководство для исследователей (образец)

Приложение 2. Форма учёта забора биообразцов (образец)

Приложение 3. Форма учета обработки биообразцов (образец)

Приложение 4. Форма учета хранения биообразцов (образец)

Приложение 5. Форма учета температуры хранения биообразцов (образец)

Приложение 6. Форма передачи биообразцов (образец)